




(1)首先把要检测的样品放入与pcr仪相匹配的反应管中;
(2)打开pcr仪机盖,将反应管平稳、端正地置入,盖好机盖;
(3)打开电源开关,按照机器屏幕显示的提示设定程序。包括温度、信号采集程序等等。
(4)用proceed键起动扩增,结束时出现“complete”。待仪器风机停止工作后,关闭电源,取出样品盖好pcr基因扩增仪护套。
注意:pcr仪工作时严禁打开机盖。
除了---,pcr仪在---、医学试验、化学分析等领域也有广泛的应用。搜科采购管家提示您,选型pcr仪时,应---关注仪器的检测灵敏度、准确性和稳定性等参数,并选择具有---的厂商生产的产品,---产品和售后服务满足您的需求。
实时荧光定量pcr仪,由荧光定量系统和计算机组成,用来监测循环过程的荧光。与实时设备相连的计算机收集荧光数据。数据通过开发的实时分析软件以图表的形式显示。原始数据被绘制成荧光强度相对于循环数的图表。原始数据收集后可以开始分析。实时设备的软件能使收集到的数据进行正常化处理来弥补背景荧光的差异。正常化后可以设定域值水平,这就是分析荧光数据的水平。
由于实时荧光定量pcr方法比elisa灵敏很多,因此,血站或---研究所一般用来研究elisa方法的漏检率,即分析elisa方法测定为阴性的血样,再用实时荧光定量pcr方法来复检。复检时,一般24个elisa阴性的血样混合成一个样本进行检测。上海用此方法在用于---制品的---中发现一例hiv,后经测定供血者,证实的确是hiv阳性。北京市红十字---中心正在测定北京血站中5万份elisa阴性血样的漏检率。由于不同地区所用的elisa试剂、方法、批号等都不相同,因此不同地区都有---进行这一工作。由于荧光定量pcr方法的快速、灵敏、定量的特点,其在研究及开发方面的应用是不胜枚举的,如研究个人基因型与之间的关系等;研究人员也可以根据自己研究项目开发其新的用途。
taqman荧光探针:pcr扩增时在加入一对引物的同时加入一个特---的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;pcr扩增时,taq酶的5-3外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条dna链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与pcr产物形成完全同步。而新型taqman-mgb探针使该技术既可进行基因定量分析,又可分析基因突变(snp),有望成为基因诊断和个体化用药分析的技术平台。