常见的易致胎儿畸形的性---原体主要有单疱---(hsvⅱ)、---(rv)、人巨细胞---(hcmv)、弓形体(tox)及衣原体(ct)。以往这些病原体诊断比较困难,主要靠培养法进行---,pcr仪,而培养法费时,代价昂贵,而且受到采样、样本保存及用药等因素的影响,基本不能在---中推广。pcr基因扩增法因其高敏感性、高特---非常适合这些---诊断及---,是的检验方法。
将标记有荧光素的taqman探针与模板dna混合后,完成高温变性,低温复性,适温延伸的热循环,实时荧光定量pcr仪批发,并遵守聚合酶链反应规律,与模板dna互补配对的taqman探针被切断,荧光素游离于反应体系中,在特定光激发下发出荧光,随着循环次数的增加,被扩增的目的基因片段呈指数规律增长,小型pcr仪,通过实时检测与之对应的随扩增而变化荧光信号强度,求得ct值,同时利用数个已知模板浓度的标准品作对照,即可得出待测标本目的基因的拷贝数。
实时荧光定量pcr仪+实时荧光定量试剂+通用电脑+自动分析软件,构成pcr-dna/rna实时荧光定量检测系统。样品到达域值水平所经历的循环数称为ct值(---点的循环数)。域值应设定在使指数期的扩增效率为,这样可以获得准确,可重复性的数据。如果同时扩增的还有标有相应浓度的标准品,线性回归分析将产生一条标准曲线,可以用来计算未知样品的浓度。
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