在pcr反应早期,产生荧光的水平不能与背景明显地区别,而后荧光的产生进入指数期、线性期和终的平台期,进口pcr仪,因此可以在pcr反应处于指数期的某一点 上来检测pcr产物的量,pcr仪多少钱,并且由此来推断模板初的含量。为了便于对所检测样本进行比较,实时荧光定量pcr仪,在real-time q-pcr反应的指数期,首先需设定一定荧光信号的域值,一般这个域值(threshold)是以pcr反应的前15个循环的荧光信号作为荧光本底信号 (baseline),荧光域值的缺省设置是3~15个循环的荧光信号的标准偏差的10倍。
1、---的实验室管理中包含了对仪器的定期质控。
2、定期对pcr仪进行温度测定可以完善实验室的管理体系。
3、pcr仪的温度条件和状态对于pcr试剂盒的研发和应用来说,是的条件之一。
4、根据测温的结果可以避免某些试剂盒对某些特定品牌型号仪器的依赖,拓宽试剂盒的应用范围。
5、在合格的仪器上做实验可以---的节约人力物力。
6、对于拥有老旧仪器和高强度使用的实验室来说,节省效果尤为明显。
三磷酸脱氧核苷酸(dntp)dntp的与浓度和pcr扩增效率有密切关系。在pcr反应中,dntp应为50-200μmol/l,尤其是注意4种dntp的浓度要相等(等摩尔配制),浓度过低又会降低pcr产物的产量。5. 镁离子浓度mg2+能与dntp结合,mg2+对pcr扩增的特---和产量有---的影响。在一般的pcr反应中,pcr仪,各种dntp浓度为20μmol/l时,mg2+浓度为1.5~2.0mmol/l为宜,mg2+浓度过高,反应特---降低,出现非特异扩增:浓度过低,会降低taqdna聚合酶的活性,使反应产物减少。
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