离心管上口径为圆口,管身下端为锥形。上口径为圆口可以增加机械强度,下截制成锥形可缩小它的体积。当微量悬浮物经离心沉淀后,可直接读出沉淀物的体积,也能很方便地观察色泽及晶体形状。微量离心管是一种小型的离心管,又称为ep(eppendorf)管,与微型离心机配套使用,用于微量试剂的分离离心。
1. 因刻度离心管是量入式量器,使用前必须清洗干净并作干燥处理。
2. 读数时,一定要正确观察弯液面,否则将引进一定的误差。
3. 使用时,离心管的数量要根据离心机的型号决定,如用双只套管的离心机做单只试验,必须在另一只离心管中装入同体积的液体,以保持平衡。
4. 离心管需与离心机适配。要根据离心机的配置,采用合适的长短和粗细的离心管。
5. 离心管套入离心机的套管中进行分层分离后,停止旋转时要让其自然停止,离心管,决不能用外力强制停止。
●打开水浴锅加热至37℃。
● 超净台上放好离心管(离心管规格选用15ml的),细胞培养瓶,移液管,紫外灭菌至少20至30分钟,吹风5至10分钟除去臭氧。
● 37℃预热好要复苏细胞的培养液,也可以不用预热培养液,根据细胞情况选择。
●向离心管中加约5至10ml培养液,从液氮罐或-80℃中取出冻存细胞,立即将冻存管放入37℃水浴中并轻轻摇动,待融化后(约2min即可)立即将解冻的细胞转移至含培养液的离心管中,800-1000rpm下离心5min,离心管型号,弃上清,加适量完全培养液轻轻吹打重悬细胞后转移至细胞培养瓶中,轻晃使瓶底液体分散均匀,标好细胞名称、代数、复苏日期,显微镜下观察后放入37℃,5%co2培养箱中。一般贴壁细胞过夜即可贴壁,换液和传代时间根据不同细胞生长情况而定。
离心机(centrifuge)是实施离心技术的装置。离心机的种类很多,按照使用目的,可两类,即制备型离心机和分析型离心机。前者主要用于分离生物材料,每次分离样品的容量比较大,后者则主要用于研究纯品大分子物质,包括某些颗粒体如---白体等物质的性质,每次分析的样品容量很小,离心管,根据待测物质在离心场中的行为(可用离心机中的光学系统连续地监测),能推断其纯度、形状和相对分子等性质。两类离心机由于用途不同,故其主要结构也有差异。通常所使用的离心机根据转子转速大小的不同可分为普通离心机、高速离心机和离心机三类。
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