三磷酸脱氧核苷酸(dntp)dntp的与浓度和pcr扩增效率有密切关系。在pcr反应中,dntp应为50-200μmol/l,尤其是注意4种dntp的浓度要相等(等摩尔配制),浓度过低又会降低pcr产物的产量。5. 镁离子浓度mg2+能与dntp结合,mg2+对pcr扩增的特---和产量有---的影响。在一般的pcr反应中,各种dntp浓度为20μmol/l时,mg2+浓度为1.5~2.0mmol/l为宜,mg2+浓度过高,反应特---降低,出现非特异扩增:浓度过低,会降低taqdna聚合酶的活性,使反应产物减少。
pcr的三个反应步骤反复进行,使dna扩增量呈指数上升。反应终的dna扩增量可用y=(1+x)n计算。y代表dn---段扩增后的拷贝数,x表示平均每次的扩增效率,n代表循环次数。平均扩增效率的理论值为100%,实际反应初期,靶序列dn---段的增加呈指数形式,随着pcr产物的逐渐积累,被扩增的dn---段不再呈指数增加,而进入线性增长期或静止期,即出现“停滞效应”,pcr仪,使平均效率达不到理论值
荧光定量pcr 因操作方便、运行速度快、实验结果准确,必然会从设备变成分子生物学实验室的基础设备。在实验技术成熟的今天,也许对你来说,难得不是实验技术上的问题——而是选择哪一种荧光定量pcr仪——你要征询实验室成员的意见、分析实验室目前乃至将来的需求、平衡实验室的预算,进口pcr仪,更要详细研究各种极富力的宣传资料,务必记得到厂家的进行参数性能的甄别,近几年市场竞争挺大的,有些销售人员为了快速签单无底线的允诺胡说,pcr仪厂家,吹嘘设备的性能,作为产品---的你,应该有自己的思路去核实设备的参数性能。
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