pcr的反应包括三个主要步骤:分别是1. denaturation 2. annealing of primers,3. extension of primers。 所谓 denaturing乃是将dna加热变性, 将双股的dna加热后转为单股dna以做为的模板. 而annealing 则是令 primers于一定的温度下附着于模板dna两端。 后在dna聚合酶 e.g. taq-polymerase 的作用下进行引物的延长 extension of primers及另一股的合成。
pcr仪是用来干什么的
简单的来说,pcr仪,就是所采集到的样品含量太低,荧光定量pcr仪价格,无---常的用仪器进行检测分析,所以需要通过pcr仪pcr技术来实现样品扩增。扩增的倍数2n次方。2-4-8-16-32-64-128-256······
通过这个技术,可以用于分子生物学研究:---定量分析,基因表达差异分析等等。医学研究:产前诊断,病原体检测如近的等等方面
根据dna扩增的目的和检测的标准,可以将pcr仪分为普通pcr仪,梯度pcr仪,进口pcr仪,原位pcr仪,实时荧光定量pcr仪四类。1. 普通pcr仪一次pcr扩增只能运行一个特定退火温度的pcr仪称作传统pcr仪,也叫普通pcr仪。如果要做不同的退火温度需要多次运行。主要是用于简单的、对目的基因退火温度的扩增。该仪器主要应用于科学研究、教学、医学---、检验检疫等机构。2. 梯度pcr仪---pcr扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(温度梯度,实时荧光定量pcr仪,通常有12种温度梯度)的pcr仪称作梯度pcr仪。因为被扩增的不同dn---段,其适退火温度是不同的,通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增,从而---pcr扩增,就可以筛选出表达量高的适退火温度,进行有效的扩增。用于研究未知dna退火温度的扩增,这样节约成本的同时也节约了时间。梯度pcr仪在不设置梯度的情况下也可以做普通pcr扩增。主要应用于科研、教学机构。
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