南京精塞玛科学仪器-pcr扩增仪-pcr仪

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    2023-6-6

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taqman荧光探针:pcr扩增时在加入一对引物的同时加入一个特---的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;pcr扩增时,taq酶的5-3外切酶活性将探针酶切降解,pcr仪,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条dna链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与pcr产物形成完全同步。而新型taqman-mgb探针使该技术既可进行基因定量分析,又可分析基因突变(snp),有望成为基因诊断和个体化用药分析的技术平台。



在普通pcr仪的基础上增加一个荧光信号采集系统和计算机分析处理系统的pcr仪称作荧光定量pcr仪。其pcr扩增原理和普通pcr仪扩增原理相同,只是pcr扩增时加入的引物是利用同位素、荧光素等进行标记,使用引物和荧光探针同时与模板特---结合扩增。扩增的结果通过荧光信号采集系统实时采集信号连接输送到计算机分析处理系统得出量化的实时结果输出。把这种pcr仪叫做实时荧光定量pcr仪(qpcr仪)。荧光定量pcr仪有单通道、双通道和多通道。当只用一种荧光探针标记的时候,选用单通道,有多荧光标记的时候用多通道。单通道也可以检测多荧光的标记的目的基因表达产物,因为一次只能检测一种目的基因的扩增量,需多次扩增才能检测完不同目的基因片段的量。主要用于医学---检测、生物研发、食品行业、科研院校等机构。



升降速率

热力块的升降速率也将影响反应的效率。这是pcr循环各阶段之间温度变化的速度。

与老式仪器相比,现代pcr扩增仪的升温速度往往更快。较新的仪器具有更快的整体循环时间和更快的升降速率,这意味着反应混合物在变性、退火和延伸步骤之间的温度时间更短。

一些现代pcr扩增仪可以通过其软件中的特定算法进行编程,以旧机器的升降速率。如果一个pcr方案是用旧机器开发和优化的,然后转移到较新的仪器上,进口pcr仪,这就---有用。

pcr机器还包括计算反应混合物达到编程温度所需时间的算法,pcr扩增仪,即所需的升降速率。为了使其准确,在pcr扩增仪上进行pcr循环编程时,必须包括反应体积。如果使用的反应体积大于所述,那么机器将错误地认为样品在实际达到所需温度之前就已经达到了。





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